PEMURNIAN EKSTRAK ANTIGEN MIKROFILARIA DAN CACING DEWASA BRUGIA MALAYI DENGAN METODA ION EXCHANGE CHROMATOGRAPHY

Salwati, Ervi and Sri Utami, Basundari and Novriani, Harli (1995) PEMURNIAN EKSTRAK ANTIGEN MIKROFILARIA DAN CACING DEWASA BRUGIA MALAYI DENGAN METODA ION EXCHANGE CHROMATOGRAPHY. Project Report. Pusat Penelitian dan Pengembangan Penyakit Menular.

Abstract

Spesifisitas untuk tes diagnostik filariasis dapat ditingkatkan, salah satu cara adalah memurnikan antigen yang digunakan untuk tes tersebut. Telah dilakukan pemurnian ekstrak antigen mikrofilaria dan cacing dewasa dengan metoda Ion Exchange Chromatography (IEX) pada resin DE-52 dengan tipe "anion exchanger". Prinsip pemurnian dengan metoda ini adalah molekul antigen dipisahkan berdasarkan muatan ion. Molekul antigen yang bermuatan negatif akan diikat oleh resin DE-52 sedangkan yang netral atau yang bermuatan sama dengan resin (muatan positif) akan terlepas. Muatan negatif dari molekul antigen yang terikat tadi dilepaskan (elute) dengan menggunakan 0.25M, 0.5M, dan 1M NaCl dalam 10mM Sodium Phosphat. Sebanyak 4 mg ekstrak antigen mikrofilaria dan 2 mg cacing dewasa dimurnikan dengan mendialisis ekstrak antigen tersebut terlebih dulu dalam 0.1M NaCl, 10mM Sodium Phosphat. Setiap fraksi dari eluent pada konsentrasi eluter yang telah disebutkan diatas, dilakukan elektroforesis dan Westernblot untuk mengetahui pola komponen antigen dan fraksi-fraksi mana yang lebih murni dengan konsentrasi eluter yang berbeda. Pada ekstrak antigen mikrofilaria diketahui fraksi yang murni pada 0.5M NaCl dalam 10mM Sodium Phosphat dan komponen antigen tersebut mempunyai berat molekul 62 Kd dan 65 Kd. Sedangkan pada ekstrak antigen cacing dewasa belum dapat disimpulkan karena eluent yang didapatkan konsentrasinya sangat rendah.

Actions (login required)

View Item